锐赛生物集团

产品简介：

• 本产品检测原理基于碘化丙啶（Propidium,PI）染色方法分析细胞周期和凋亡。碘化丙啶是一种双链DNA染料，其嵌入双链DNA 中可以产生荧光，并且荧光的强度和双链 DNA 的量成正比。

• 在细胞周期中，G0和G1 期细胞有一套染色体，G2 和 M 期细胞有两套染色体，S 期介于两者之间。经过碘化丙啶染色后，处在不同细胞周期中的细胞的荧光强度是不一样的。假定G0 和 G1 期的细胞荧光强度为 1，那么G2 和 M 期的细胞的荧光强度为 2，S 期的细胞介于 1和 2之间。

• 细胞凋亡时，由于细胞核皱缩和DNA 片段化，染色时 DNA 片段会从打孔的细胞膜处丢失，流式细胞仪检测时，荧光强度小于 1，即Sub-G1 峰或者凋亡细胞峰。

• 细胞凋亡也可以用流式细胞仪观察细胞光散射的变化来检测。凋亡前期，染色质皱缩，细胞密度增加，前向角光散色显著降低。凋亡后期，细胞产生凋亡小体，前向角光散射和侧向角光散色都显著降低。

• 本试剂盒可用于培养的贴壁细胞或者悬浮细胞检测，也可用于组织细胞检测。

贮藏条件：

-20℃，避光条件下，保存1年以上。0-5℃，避光条件下，可以保存2个月。

使用说明：

1.自备试剂：PBS；70%乙醇

2.细胞样品准备：

a、 贴壁细胞：吸弃细胞培养液，胰酶消化吹打细胞，制备单细胞悬液，1000g离心 5分钟沉淀细胞后，用1ml 预冷的 PBS 重悬。然后再一次 1000g 离心 5分钟沉淀细胞。

b、 悬浮细胞：1000g 离心 5分钟沉淀细胞后，用1ml 预冷的 PBS 重悬。然后再一次 1000g 离心 5分钟沉淀细胞。

c、 组织细胞：将组织块用剪刀剪成尽量小的小块后，用0.25%的胰酶消化 0.5-1 个小时。经过 200-400 目筛网过滤得到单细胞悬液。1000g离心 5分钟沉淀细胞后，用1ml 预冷的 PBS 重悬。然后再一次 1000g 离心 5分钟沉淀细胞。

3.细胞固定：细胞沉淀用 1ml 预冷的 70%乙醇轻轻混匀，4℃固定 2个小时以上或者过夜。接下来1000g 离心 5 分钟沉淀细胞后，用 1ml 预冷的PBS 重悬。然后再次 1000g 离心 5 分钟沉淀细胞。

4.染色：碘化丙啶染色液配置：0.5ml 染色缓冲液中加入10 ul碘化丙啶储液和10ul RNase A，混匀待用。每个细胞样品加入 0.5ml 配置好的碘化丙啶染色液，轻轻混匀重悬细胞。37℃，避光温浴30 分钟后，即可上流式细胞仪检测（5 小时内完成为佳）。激发波长为 488nm，检测红色荧光。

注意事项：

1. 操作碘化丙啶时，应注意防护，保护眼睛、避免吸入、并戴一次性手套。

2. 碘化丙啶存在淬灭现象，保存和使用过程中注意避光。

包装规格：